做液相色谱分析时，让人头疼的莫过于仪器突然 “闹脾气”—— 压力莫名飙升、峰形变得乱七八糟、保留时间忽前忽后…… 遇到这些情况，十有八九是色谱柱堵了。别慌，掌握一套实用的排查和疏通方法，就能让您的色谱柱 “起死回生”，还能延长它的使用寿命，帮实验室省下不少成本。

一、先判断：色谱柱是不是真堵了？

要解决问题，先得确认问题。当茄子污视频出现这些 “异常信号” 时，您就得警惕色谱柱可能堵了：

压力异常升高：这是明显的信号。系统压力比方法刚建立时高了不少，或者在短时间内一个劲地往上窜。

峰形异常：色谱峰变得不规整，出现分叉、拖尾、前沿的情况，峰面积也明显变小，分离效果大不如前。

保留时间漂移：目标化合物的保留时间不稳定，变化很明显。

压力波动剧烈：就算不进样，系统压力也忽高忽低，很不稳定。

二、再定位：堵的是柱子还是其他地方？

发现压力高，可别一股脑儿就怪色谱柱，系统其他地方也可能出问题。用一个简单的 “断开法” 就能找到问题所在：

断开色谱柱：把色谱柱从流路里取下来，用两通或者短路接头把泵和检测器连起来。

运行方法：按照相同的流速冲洗系统。

观察压力：

如果压力还是很高，说明堵塞的地方在色谱柱之前，可能是过滤白头、保护柱、在线过滤器或者管路，得一个个排查清洗或更换。

如果压力恢复正常，那问题大概率出在色谱柱本身或者保护柱上。这时候可以先试试更换或卸下保护柱再测试，要是压力正常，就是保护柱脏了；要是压力还是高，那就是色谱柱堵了。

三、实战疏通：四步搞定色谱柱堵塞

确定是色谱柱堵塞后，清洗要遵循 “从温和到强力” 的原则，千万别一开始就用强溶剂和高流速，不然可能会对柱子造成二次伤害。

第一步：反向冲洗（常用也有效）

大部分色谱柱是允许反冲的（但一定要看说明书确认）。把色谱柱的入口和出口调换连接，用合适的流动相反向冲洗，能把堵在柱头的颗粒污染物冲出来。

注意：有些特殊键合相的柱子，比如某些糖分析柱，不建议反冲，操作前一定要查阅说明书。

第二步：梯度清洗（针对强保留污染物）

根据污染物的性质，比如脂类、蛋白质、疏水性强的物质等，选择不同的清洗溶剂序列。清洗前一定要确保所用溶剂和当前流动相互溶，防止盐析出来！

推荐一个清洗流程：

先用纯水（或 95% 水 + 5% 有机相）以 0.2-0.5 mL/min 的低速冲洗 30 倍柱体积，把缓冲盐去掉。

再用强溶剂（如乙腈或甲醇）低速冲洗 30 倍柱体积。

针对有机污染物：按照乙腈→异丙醇→二氯甲烷（或氯仿，要确认柱子是否兼容）→异丙醇→乙腈的顺序，每种溶剂低速冲洗 20-30 倍柱体积。

针对蛋白质 / 生物样品：可以用 0.1% TFA 水溶液→乙腈→异丙醇的序列清洗。

后用初始流动相平衡色谱柱。

第三步：更换筛板 / 再生

如果清洗后效果不好，可能是柱头筛板堵得太严重了。有经验的用户可以在厂家指导下试试更换柱头筛板，但这有一定风险，可能会破坏柱床。要是柱子很贵重，也可以联系厂家进行专业的再生维护。

第四步：后的尝试

如果所有方法都没用，而且柱子过了保修期、价值不高，那可以试试卸下柱头，用软布蘸着溶剂轻轻擦顶端筛板，或者用极细的针头轻轻疏通。这个操作风险很高，很容易损坏柱子，只能作为后的尝试。

四、日常维护：预防堵塞更重要

其实，90% 的堵塞问题都能通过良好的操作习惯来避免，做好日常维护比出了问题再解决要省事得多：

一定要用保护柱：保护柱就像色谱柱的 “金钟罩”，能有效拦住颗粒物和强保留物质，性价比很高。

做好样品前处理：样品必须用 0.22 μm 或 0.45 μm 的滤膜过滤，把微小颗粒彻底去掉。

妥善处理流动相：所有流动相，特别是水相和缓冲盐，必须用高纯试剂，还要经过抽滤脱气。缓冲液好现配现用，防止长菌。

正确过渡流动相：方法结束后，如果用了缓冲盐，必须先用高比例水相（>10%）冲洗至少 30 分钟，把盐分彻底冲干净，再过渡到有机相保存，绝对不能把色谱柱长时间放在缓冲盐溶液里。

操作要温柔：避免流速和压力剧烈变化，遵守色谱柱的 pH 和压力限值。

色谱柱是茄子污视频的 “心脏”，价格不菲。掌握正确的堵塞处理和日常维护方法，不仅能帮您节省宝贵的实验时间和维修成本，还能保证分析数据的准确可靠。下次再遇到压力飙升的情况，相信您一定能从容应对，让您的色谱仪很快恢复高效工作状态！